一、操作步骤：
 

　　1)首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。
 

　　2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
 

　　3)正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止) 。
 

　　4)一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，重要的是仪器基线走后，方可进样测试。
 

　　5)同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。
 

　　6)样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。
 

　　7)关机时，先关计算机，再关液相色谱。
 

　　8)填写登记本，由负责人签字。
 

　　二、注意事项：
 

　　1)流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。
 

　　2)柱子是非常脆弱的，做的方法，先不要让液体过柱子。
 

　　3)所有过柱子的液体均需严格的过滤。
 

　　4)压力不能太大，建议不要超过150kgf/cm2 .
 

　　5).因为缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洁。
 

　　潮湿环境中如何维护液相色谱仪
 

　　操作人员*关心的是分析结果，而检测器是HPLC的眼睛。由于很多时候天气潮湿，很容易使检测器精密的光学部件性能受到影响，导致灵敏度下降或波长检验通不过，更严重者：灯电路板、预放大板及CPU板同时被短路击坏。而这类情况在干燥的北方地区则比较少。由此可见，潮湿气候对仪器损害之大。
 

　　在多雨季节到来之前，勿请用户将仪器调整放置在通风条件好，湿度低(<70%)的实验室内。同时，给实验室配备去湿机、空调及通风装置。表面上看，虽然增加了支出，但您的实际回报将大大超出您的支出。