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菌落总数即为食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
每种细菌都有它一定的生理特性,培养时应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、pH、需氧性质等)去满足其要求才能将各种细菌都培养出来。但在实际工作中,一般都只用一种常用的方法。细菌菌落总数的测定,所得结果,只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温性需氧菌的菌落总数。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
菌落总数检测一般步骤为:
采样 — 样品制备与稀释 — 倒平板 — 涂布平板 — 倒置培养 — 菌落计数 — 计算菌落总数
在常见的菌落检测过程中,有哪些产品是可以使用呢?我们在此梳理一下。
样品制备,需要对样品进行均质,根据需要检测的样品不同。应用不同的均质设备,如均质机,拍打式均质器等;
样品的稀释,国标中采用1:10的十倍稀释方法,各种手动精密移液器,瓶口分液器,移液管控制器为液体操作提供了保证。
倒平板,使用的培养基为含有琼脂的固体培养基。培养基在配备的过程中需要经过煮沸和保温的步骤。加热磁力搅拌器,可极大节约培养基制备时间。在倒平板之前,需要恒温培养基46±1 ℃, 恒温水浴锅,可以提供的温度控制和恒温条件;
涂布平板,培养基在培养皿中冷却成固态之后,将稀释后的样品用移液器取1mL,滴到培养基表面,用涂布棒涂匀。有的培养皿转盘,可以有效的将样品液均匀的涂布在培养基表面。
倒置培养,将涂布完毕的平板,放入恒温培养箱中进行培养,一般培养时间约为48h。各种规格的台式及落地式培养箱,非常适合规范化培养要求。
菌落数计算,经过48小时的培养之后,在培养基表面会长出菌斑,每个菌斑代表一个微生物。一般在培养皿中菌落数为30-300个之间,为有效菌落数。低于30个,会因为样本量不足,随机性大;超过300个,会因为菌落数太多,过于密集产生菌斑重叠等现象,不利于准确计数。菌落计数器,是带有非闪烁式环形光源,放大镜,压力传感器,计数笔等,可以让使用者轻松计数。
计算菌落总数,培养皿中的菌落数需要通过公式换算。 菌落计数器配套软件可以直接通过压力传感器进行培养皿中菌落计数,通过软件内嵌程序直接计算出被检测样品中菌落总数。