一、 实验目的 
1、 巩固紫外--可见分光光度法理论知识。 
2、 掌握国产紫外分光光度计的基本构成及使用方法。

3、 掌握废水中NO3-—N的紫外分光光度法测定方法 
 
二、 概述 
1、 方法原理 
利用硝酸根离子在220nm波长处的吸收而定量测定硝酸盐氮。溶解的有机物在220nm处也会有吸收，而硝酸根离子在275nm处没有吸收。因此，在275nm处作另一次测量，以校正硝酸盐氮值。 
因此，硝酸根离子在220nm波长处的校正吸收值为  △A = A220 – 2 A275 。 

2、干扰及消除 
    溶解的有机物、表面活性剂、亚硝酸盐、六价铬、溴化物、碳酸氢盐和碳酸盐等干扰测定，需进行适当的预处理。本法采用絮凝共沉淀和大孔中性吸附树脂进行处理，以排除水样中大部分常见有机物、浊度和 Fe3+、Cr6+对测定的干扰。 

3、方法的适用范围 
    本法适用于清洁地表水和未受明显污染的地下水中硝酸盐氮的测定，其zui低检出浓度为0.08mg／L，测量上限为 4mg／L硝酸盐氮。    

4、仪器 
①紫外分光光度计。

②离子交换柱（φ1.4cm，装树脂高5～8cm）。    

5、试剂 
① 氢氧化铝悬浮液：

②10％硫酸锌溶液。 
③5mol/L氢氧化钠溶液。 
④大孔径中性树脂：CAD-40或XAD-2型及类似性能的树脂。

⑤甲醇。 
⑥lmol/L盐酸（优级纯）。 
⑦硝酸盐标准贮备液：每毫升含0.100mg硝酸盐氮。

⑧0.8％氨基磺酸溶液：避光保存于冰箱中。 

三、 实验步骤 
1、吸附柱的制备 
    新的树脂先用200ml水分两次洗涤，用甲醇浸泡过夜，弃去甲醇，再用40ml甲醇分两次洗涤，然后用新鲜去离子水洗到柱中流出液滴落于烧杯中无乳白色为止。树脂装入柱中时，树脂间绝不允许存在气泡。    

2、水样的测定 
    ①量取200ml水样置于锥形瓶或烧杯中，加入2ml硫酸锌溶液，在搅拌下滴加氢氧化钠溶液，调至pH7。或将200ml水样调至pH7后，加 4ml氢氧化铝悬浮液。待絮凝胶团下沉后，或经离心分离，吸取 100ml上清液分两次洗涤吸附树脂柱，以每秒1至2滴的流速流出（注意各个样品间流速保持一致）。弃去。再继续使水样上清液通过柱子，收集50ml于比色管中，备测定用。树脂用150ml水分三次洗涤，备用。 
    注：树脂吸附容量较大，可处理50～100个地表水水样（视有机物含量而异）。使用多次后，可用未接触过橡胶制品的新鲜去离于水做参比，在220nm和275nm波长处检验，测得的吸光度应接近零。超过仪器允许误差时，需以甲醇再生。    

②加 1.0ml盐酸溶液，0.1ml氨基磺酸溶液于比色管中（如亚硝酸盐氮低于0.1mg／L时，可不加氨基磺酸溶液）。 
③用光程长10mm石英比色皿，在 220nm和 275nm波长处，以经过树脂吸附的新鲜去离子水50ml加 lml盐酸溶液为参比，测量吸光度。    

3、校准曲线的绘制 
    于6个200ml容量瓶中分别加入0.50、l.00、2.00、3.00、4.00ml硝酸盐氮标准贮备液，用新鲜去离子水稀释至标线，其浓度分别为0.25、0.50、l.00、l.50、2.00mg／L硝酸盐氮。按水样测定相同操作步骤测量吸光度。    

四、计算 
  △A = A220 – 2 A275  
式中：A220－220nm波长测得吸光度；       A275－275nm波长测得吸光度。

求得吸光度的校正值（△A ）以后，从校准曲线中查得相应的硝酸盐氮量，即为水样定结果（mg／L）。水样若经稀释后测定，则结果应乘以稀释倍数。    

五、注意事项 
①为了解水受污染程度和变化情况，需对水样进行紫外吸收光谱分布曲线的扫描，如无扫描装置时，可用手动在220～280nm、每隔2～5nm测量吸光度，绘制波长一吸光度曲线。水样与近似浓度的标准溶液分布曲线应类似，且在220nm与275nm附近不应有肩状或折线出现。 
    参考吸光度比值（A275／A220）* 100％应小于 20％，越小越好。超过时应予以鉴别。 
    水样经上述方法适用情况检验后，符合要求时，可不经预处理，直接取50ml水样于比色管中，加盐酸和氨基磺酸溶液后，进行吸光度测量。如经絮凝后水样亦达到上述要求，则也可只进行絮凝预处理，省略树脂吸附操作。 
②含有有机物的水样，而且硝酸盐含量较高时，必须先进行预处理后再稀释。    

③大孔中性吸附树脂对环状、空间结构大的有机物吸附能力强；对低碳链、有较强极性和亲水性的有机物吸附能力差。 
④当水样存在六价铬时，絮凝剂应采用氢氧化铝，并放置0.5h以上再取上清液供测定用。